Proteinas ll

Diálisis:

La diálisis es el proceso de separar las moléculas en una solución por la diferencia en sus índices de difusión a través de una membrana semipermeable.

Típicamente una solución de varios tipos de moléculas es puesta en un recipiente semipermeable. El recipiente de diálisis sellado se coloca en un envase con una solución diferente, o agua pura. Las moléculas lo suficientemente pequeñas como para pasar a través de los poros (a menudo agua, sales y otras moléculas pequeñas) tienden a moverse hacia adentro o hacia afuera del recipiente con la membrana semipermeable en la dirección de la concentración más baja. Moléculas más grandes (a menudo proteínas, ADN, o polisacáridos) que tiene dimensiones significativamente mayores que el diámetro del poro son retenidas dentro de él. Una razón común de usar esta técnica puede ser para quitar la sal de una solución de la proteína. Considerando todo lo previamente dicho podríamos sostener que en una diálisis, mientras que las sales pueden pasar libremente por la membrana, las proteínas quedan dentro, y ésto es lo que nos propusimos experimentar.

Materiales:

- Dializador (gomita elástica, botella cortada, papel celofán)
- Ovoalbúmina
- AgNO3 (Nitrato de Plata)
- Vaso de Bohemia
- NaCl disociado
- Agua destilada

Ejecución:

Colocamos el recipiente con la membrana semipermeable (en este caso, papel celofán) dentro del vaso de bohemia que contenía agua destilada. Agregamos ovoalbúmina más cloruro de sodio dentro del recipiente con la membrana semipermeable. Luego de un rato, el suficiente para considerar realizada la diálisis, tomamos dos muestras del interior del recipiente y dos muestras del exterior

PARTE1:

1) Colocar en dos tubos de ensayos muestra de la solución del interior del dializador
2) Aplicarle la reacción de Biuret y AgNO3

En agua, tanto el nitrato de plata como el cloruro de sodio de disocian de la siguiente manera:

AgNO3 → (Ag +) + (NO3-) (ac)
Catión Plata Anión Nitrato

NaCl → (Na+) + ( Cl -) (ac)
Catión Sodio Anión Cloruro

Para luego:
(Ag+) (ac) + (Cl-) (ac) → AgCl (s)
Cloruro de Plata

El cloruro de plata es un sólido blanco, y su formación es lo que determina que el ensayo sea positivo o negativo

Resultado:

Conclusión: Ambas reacciones dieron positivas.

La muestra sometida al ensayo de biuret se tornó violeta (lo que quiere decir que la muestra contiene proteinas que presentan dos o más enlaces peptidicos) y la muestra sometida a AgNO3 dio blanco (se formó cloruro de plata, lo que quiere decir que la muestra contiene sales)

PARTE 2:

1) tomar dos muestras del exterior del dializador y colocarlas en tubos de ensayo

2) Aplicarle la reacción de Biuret y AgNO3

Resultado:

Conclusión: Si bien el AgNO3 nos dio positivo (lo que significa que hay presencia de sales) el ensayo de Biuret nos dio negativo (no se tornó a violeta), lo que quiere decir que no hay proteínas en la muestra. Esto prueba que las proteínas no atravesaron la membrana semipermeable del dializador.

Conclusión final:

Teniendo en cuenta los resultados obtenidos en ésta práctica podemos decir que la membrana semipermeable actuó como dializador ya que permitió el pasaje de una sal pero no de una proteína.